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產品詳情
操作說明
注意事項
品簡介
Hoechst 33258分子式為C25H24N6O·3HCl，分子量為533.88，CAS編號為23491-45-4，是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，當與雙鏈DNA大溝結合以后熒光顯著增強。最大激發波長為346 nm，最大發射波長為460 nm。Hoechst 33258常用于細胞凋亡檢測，細胞核染色，或常規的DNA染色。可用于固定細胞、組織或非固定細胞、組織的細胞核染色，染色后可用熒光顯微鏡觀察，或流式細胞儀檢測。熒光顯微鏡觀察時用紫外光激發，為藍色熒光。
本產品為即用型溶液，濃度經優化可滿足各種常規染色的需要。
儲存與運輸
冰袋（wet ice）運輸；4℃避光保存，有效期6個月。
操作步驟
1.對于固定的細胞或者組織切片：
a.對于固定的細胞或組織樣品，固定后去除固定液，使用PBS或者其他合適的緩沖液洗滌2-3次，每次3-5 min（如檢測懸浮細胞，請按懸浮細胞常規操作方式進行，實驗均需添加離心等步驟）；
b.（可選步驟）如需對固定的細胞或者組織進行免疫熒光染色等處理，則優先進行相關處理，處理后再進行Hoechst 33258染色；
c.直接取適量本產品Hoechst 33258染液（即用型）覆蓋樣品，室溫避光孵育5 min左右；
d.去除染液，用PBS或者其他合適的緩沖液洗滌2-3次，每次3-5 min；
e.封片后或者直接置于熒光顯微鏡下觀察，激發波長為350 nm，發射波長為460 nm。
2.對于活細胞或者培養組織：
a.細胞培養物中加入適量本產品Hoechst 33258染液（即用型），充分覆蓋待染色的樣品；通常六孔板一個孔中需加入1 mL染色液，96孔板一個孔中需加入100 μL染色液；于37℃培養箱中，孵育10-20 min；
b.去除染液，用PBS或者其他合適的緩沖液洗滌2-3次，每次3-5 min；
c.直接于熒光顯微鏡下觀察，激發波長為350 nm，發射波長為460 nm。
注意事項
1. 熒光染料都存在熒光淬滅的問題，建議染色后盡快完成拍照。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片劑。
2. 操作時請穿實驗服，佩戴一次性手套。
本產品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
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